
检测限制: 96T1.2 ng/ml -40 ng/ml使用缱绻:本试剂盒用于测定东说念主血清、血浆及关联液体样本中基膜聚糖(lumican)含量。施行旨趣本试剂盒运用双抗体夹心法测定标本中东说念主基膜聚糖(lumican)水平。用纯化的东说念主基膜聚糖(lumican)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中递次加入基膜聚糖(lumican),再与HRP记号的基膜聚糖(lumican)抗体吞并,造成抗体-抗原-酶标抗体复合物,历程透彻洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下变嫌成蓝色,并在酸的作用下变嫌成最终的黄色。样貌的浅深和样品中的基膜聚糖(lumican)呈正关联。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过范例弧线琢磨样品中东说念主基膜聚糖(lumican)浓度。试剂盒构成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7
间隔液
6ml×1瓶
2
酶标试剂
6ml×1瓶
8
范例品(80 ng/ml)
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×8条
9
范例品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
6ml×1瓶
10
诠释书
1份
5
显色剂A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1个
1.标本鸠合后尽早进行索要,索要按关联文件进行,索要后应尽快进行施行。若不可立时进行覆按谷物肉系列,可将标本放于-20℃保存谷物肉系列,但应幸免反复冻融2.不可检测含NaN3的样品谷物肉系列,因NaN3扼制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作要领1. 范例品的稀释:本试剂盒提供原倍范例品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
40 ng/ml
5号范例品
150μl的原倍范例品加入150μl范例品稀释液
20 ng/ml
4号范例品
150μl的5号范例品加入150μl范例品稀释液
10 ng/ml
3号范例品
150μl的4号范例品加入150μl范例品稀释液
5 ng/ml
2号范例品
150μl的3号范例品加入150μl范例品稀释液
2.5 ng/ml
1号范例品
150μl的2号范例品加入150μl范例品稀释液
2. 加样:分袂设空缺孔(空缺对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作换取)、范例孔、待测样品孔。在酶标包被板上范例品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不波及孔壁,
制服下的诱惑轻轻浪荡混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5. 洗涤:堤防揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如斯类似5次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空缺孔以外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻轰动混匀,37℃避显豁色15分钟.10. 间隔:每孔加间隔液50μl,间隔响应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空缺空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加间隔液后15分钟以内进行。操作措施总结: 琢磨 以范例物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出范例弧线,字据样品的OD值由范例弧线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用范例物的浓度与OD值琢磨出范例弧线的直线记忆方程式,将样品的OD值代入方程式,琢磨出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的本体浓度。防卫事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温均衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响成果。3.各步加样均应使用加样器,并往往校对其准确性,以幸免覆按流毒。一次加样时辰最佳截止在5分钟内,如标本数目多,保举使用排枪加样。4. 请每次测定的同期作念范例弧线,最佳作念复孔。如标本中待测物资含量过高(样本OD值大于范例品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,琢磨时请终末乘以总稀释倍数(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以幸免交叉玷辱。6.底物请避光保存。7.严格按照诠释书的操作进行,覆按成果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有这个词样品,洗涤液和多样撤废物皆应按传染物处置。9.本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文诠释书有异,以英文诠释书为准。保存条目及有用期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有用期:6个月
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